Ce qui est puma heart noir nouveau dans nos résultats, c'est l'inférence d'une expansion démographique substantielle en Amérique du Sud. Il y a 8 000 ans, probablement induite par la libération d'interactions compétitives avec d'autres grands carnivores qui s'étaient éteintes lors de l'événement du Pléistocène supérieur. Nous ne voyons aucune preuve d'une expansion secondaire en Amérique du Nord, car l'ensemble de données complet reflète les résultats observés avec l'Amérique du Sud uniquement.
La plupart des agents anticancéreux induisent une apoptose intrinsèque à médiation par les mitochondries plutôt qu'une apoptose à médiation par un récepteur de mort extrinsèque [19; 20]. Les membres anti-apoptotiques de la famille de protéines Bcl-2, y compris Bcl-2, Bcl-xL basket puma heart et Mcl-1, sont les gardiens de l intégrité mitochondriale [19; 21; 22]. Inversement, les membres proapoptotiques de la famille de protéines Bcl-2 fonctionnent en antagonisant les protéines anti-apoptotiques et incluent .
Nous avons étudié l'interaction entre PUMA puma suede heart et l'EGFR et son rôle potentiel dans les monothérapies mono et combinatoires ciblées sur l'EGFR. Nos résultats montrent que paradoxalement, l'EGFR et l'EGFRvIII de type sauvage coexpriment avec la protéine pro-apoptotique PUMA dans des cellules GBM, in vitro et in vivo. EGFR et EGFRvIII interagissent avec PUMA de manière constitutive et sous stress apoptotique, conduisant à la séquestration cytoplasmique de PUMA dans les cellules GBM.
L'anticorps monoclonal de souris anti-Myc a été puma future acheté chez Roche (Indianapolis, IN). L'anticorps monoclonal de souris anti-laminaire B provenait de Calbiochem (San Diego, CA). Les anticorps anti-²-actine et ±-tubuline ont été obtenus auprès de Sigma. L'anticorps Cox IV polyclonal de lapin provenait de Abcam (Cambridge, MA), alors que les anticorps polyclonaux de lapin PUMA, Bad, Bim, Bmf, Bok, pEGFR (Y1068), Bcl-2, Bcl-xL et Mcl-1 ont été achetés auprès de Cell Signaling ( Danvers, MA).
Les coupes de tissus ont été déparaffinées, déshydratées et soumises à une récupération d'antigène dans un tampon contenant de l'EDTA dans un four. L'activité de la peroxydase endogène a été bloquée avec du peroxyde d'hydrogène à 0,3% et les lames ont été incubées avec du sérum de chèvre normal puma r698 à 10% pendant 30 min, puis avec un anticorps monoclonal de souris anti-EGFR (1:50; Novocastra RTU-EGFR-384) et polyclonal de lapin anti-PUMA. anticorps (1: 100;
Signalisation cellulaire) à 4 ° C pendant la nuit. Après lavage avec du PBS, les lames ont été incubées avec des anticorps secondaires biotinylés, puis avec un complexe avidine-biotine-peroxydase de raifort. La détection a été effectuée en utilisant 0,125% de chromogène d'aminoéthylcarbazole. Après la contre-coloration à l hématoxyline de Mayer (Sigma), les côtés ont été montés. La notation a été réalisée par un pathologiste. Les scores histologiques (H-Scores) ont été calculés à partir du% de positivité .